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2022-06-09 10:07:19
腺病毒包裝

一、 實驗原理 

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二、應(yīng)用簡介

腺病毒(Adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70~90 nm的病毒顆粒,為線狀雙鏈DNA分子,約含35000 bp,兩端各有長約100 bp的反向重復(fù)序列。

實驗平臺的腺病毒為5型血清型腺病毒,缺失了腺病毒的早期表達(dá)基因序列E1區(qū)和E3區(qū)。E1是腺病毒復(fù)制所必須的,E1的缺失使其不能自身復(fù)制,只能依靠包裝細(xì)胞如HEK293細(xì)胞提供的反式互補進(jìn)行復(fù)制擴增,以此保證腺病毒的安全性。E3基因表達(dá)的蛋白能對抗宿主的抗病毒防御系統(tǒng),E3區(qū)的去除能減少宿主的體內(nèi)免疫反應(yīng)。

腺病毒包裝采用的是最新的AdMax系統(tǒng),通過Cre-loxp重組酶,使共轉(zhuǎn)染到HEK293細(xì)胞中的腺病毒載體穿梭質(zhì)粒和骨架質(zhì)粒(腺病毒基因組質(zhì)粒)在重組酶的作用下產(chǎn)生重組腺病毒,獲得的病毒滴度更高,其病毒滴度可以達(dá)到1×10^12pfu/ml 。

腺病毒載體有CMV、mCMV、CAG、PGK、UbC、EF1a、等多種啟動子可供選擇;而且還有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多種熒光標(biāo)記蛋白可供選擇。

 

三、實驗方法 

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四、樣本送檢要求

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交付標(biāo)準(zhǔn):

滴度:>108TU/ml

規(guī)格:1ml

贈送陰性對照病毒規(guī)格:0.2ml(>108TU/ml)

 

五、案例展示

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過表達(dá)腺病毒感染原代大鼠神經(jīng)元細(xì)胞圖片

 

六、常見問題

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七、服務(wù)流程

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